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          基礎信息Product information
          產品名稱:

          精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)

          產品型號:

          廠商性質:生產廠家

          所在地:三明市

          更新時間:2015-07-14

          產品簡介:

          精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)要用于成年男性精子核蛋白的染色,便于醫生顯微鏡下觀察成熟精子及計算不成熟精子比例。評估精子成熟率對生育的影響。
          本試劑無須特殊儀器,簡單、快速、準確。
          包裝規格:20人份/盒、40人份/盒。

          產品特性Product characteristics

          精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)品    名】

          精子五聯檢:精子核蛋白染色試劑盒(苯胺藍染色法)

          【研發依據】

          正常情況下,與精核DNA結合的堿性蛋白(核蛋白)將經歷從組蛋白到魚精蛋白的自然成熟過程,這種成熟后的魚精蛋白對精子基因(DNA)具有特殊保護作用。

          組蛋白被魚精蛋白逐漸取代的過程,稱之為精子核蛋白組型轉換,這種組型轉換具有重要的生理意義。但當核蛋白組型轉換異??梢鹉行圆挥蚺咛ピ缙谪舱哿鳟a,其機理為:①精子DNA不穩定且易受損傷而難以受孕;②一旦受精,由于核蛋白組型異常,精子核不能正常解聚,從而影響了雌雄原核的融合;③胚胎不能正常發育,造成胚胎夭折而流產。

          預期用途】

          主要用于成年男性精子核蛋白的染色,以此評估成年男性精子成熟比例,可評價男性生育功能。

          【試劑特點】無須特殊儀器,簡單、快速、準確。

          檢驗原理】

          成熟精子的核蛋白成份為魚精蛋白,富含精氨酸和胱氨酸殘基;不成熟精子的核蛋白成份為組蛋白,富含賴氨酸殘基。酸性條件下,苯胺藍與賴氨酸殘基結合生成紫藍色化合物,從而指示不成熟核蛋白的存在,而核蛋白成熟的精子則染成紅色。

          【組成成份】

          試劑主要由苯胺藍、氧雜蒽、冰醋酸、磷酸鹽緩沖液等配制而成。

                        規格

            組  份

          20人份/盒

          40人份/盒

          A液(10×濃縮洗滌液)

          10ml×1瓶

          20ml×1瓶

          B液(固定液)

          5ml×1瓶

          10ml×1瓶

          C液(染色液)

          5ml×1瓶

          10ml×1瓶

          D液(10×濃縮洗脫液)

          10ml×1瓶

          20ml×1瓶

          E液(復染液)

          5ml×1瓶

          10ml×1瓶

          防脫載玻片

          20

          40

          說明書

          1

          1

          【樣本要求】液化后的新鮮精液標本

          操作方法】

          1.試劑的準備

          1)洗滌工作液的配制:A液(10×濃縮洗滌液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存備用;

          2)洗脫工作液的配制:D液(10×濃縮洗脫液)以蒸餾水10倍稀釋,4℃保存備用。

          2.樣本準備

          1)新鮮精液標本置于37恒溫水浴箱中完全液化。

          2)精子的洗滌及稀釋,方法如下: Eppendorf管中加入0.2—0.5ml的精液和洗滌工作液1ml,以一次性吸管反復吹打精子數次后,2000離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團; Eppendorf管中加入洗滌工作液1.5ml,以一次性吸管反復吹打精子數次后,2000離心5min,棄去上清液,保留管底精子沉淀團; 再次重復的操作,離心結束后,棄去上清液。Eppendorf管中加入洗滌工作液約0.1—0.2ml,混合精子懸液。

          3.檢測步驟

          1)取上述已制備好的精子懸液15μl,均勻涂布于防脫載玻片上,自然干燥。

          2)在涂有待測精子的涂片區內,滴加B液(固定液)2—3滴,室溫反應2min。

          3)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區內的精子),甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

          4)在涂有待測精子的涂片區內,滴加C液(染色液)2—4滴,室溫反應5min。

          5)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區內的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

          6)將載玻片豎直插入已盛有洗脫工作液的反應池中,使待測標本涂片區完全浸沒于洗脫工作液中,室溫反應5min。

          7)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區內的精子),并甩去多余水份(注意防止涂片干燥)。

          8)在涂片區內滴加E液(復染液)2—4滴,室溫反應5min。

          9)以流水輕輕沖去載玻片上的試劑(注意控制水流速度,以免洗脫涂片區內的精子),迅速吹干玻片。(如果需要長久保存該涂片樣本,可選擇完成以下脫水步驟:分別將組織片依次置于70%、90%100%乙醇中各2min,晾干。)

          10)鏡檢。

          染色結果】

          核蛋白不成熟的精子染色呈紫藍色或紫色,核蛋白成熟的精子染色呈紅色。

          【參考值】 DFI(單鏈DNA精子)<10%為正常;當DFI>25%時,受精率<20%。

          注意事項】

          1.受試者應按照WHO技術規范采集精液標本。

          2.若精液標本粘稠度高或液化不完全,可導致檢測結果非特異性假陽性。需要預先降低精液粘度或促進精液完全液化后,才能用于檢測。

          3. 精子密度過高可能導致脫色不均勻,從而對檢測結果產生不良影響;精子密度過低則不會影響檢測結果;涂片時應避免涂布過于稠密。

          4. 精子洗滌不充分可影響顯微鏡觀察結果。

          5. 染紫藍色精子為核蛋白不成熟精子,染紅色精子為核蛋白成熟的精子。由于精子核蛋白存在組蛋白-魚精蛋白的過渡期,因此此類精子頭部呈淡藍色或紫色;精子頭部局部染淡藍色或紫色、頂體膜邊緣染紫藍色,均是精子不夠成熟的表現。

          6. 鏡下觀察結果時,不要在精子堆集分布的區域計數,應選擇精子散在分布的區域進行計數。

          7. 受檢者所有樣品均應視為潛在的傳染源,檢測完畢的樣本、試劑均須作為醫療廢物處理,避免污染環境。

          8.精子核蛋白染色試劑盒為體外診斷試劑,檢測結果僅供臨床參考,對患者的臨床管理應結合其癥狀/體征、病史、其它實驗室檢查及治療反應等情況結合考慮。

          【基本信息】

          產品注冊證號:閩明食藥監械(準)字2013第1400022號

          執行產品標準:YZB/閩明0034-2013

          醫療器械生產企業許可證號:閩食藥管械生產許第20110297號

          規  格:20人份/盒、40人份/盒

          存儲條件及有效期:試劑盒于2-8避光保存,有效期12個月。

          【附錄】

          影響精子受精或男性不育的因素

          1.精子死亡率過高

          2.精子畸形率過高

          3.精子成熟率過低

          4.精子染色體異常

          5.精子數量過少

          6.精子活動力過低

          7.精子液化能力過低

          三明市和眾生物技術有限公司——生殖醫學檢測試劑盒系列

          1、精子DNA檢測試劑盒

          2、精子DNA碎片檢測試劑盒

          3、精子活性檢測試劑盒

          4、精子形態學檢測試劑盒

          5、精子核蛋白檢測試劑盒

          五項聯合檢測,診斷分析精子的受精及生育能力,無須儀器,簡單、快速、準確,不孕不育科的zui佳診斷方案。

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