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    操作需謹慎!巴氏染色液操作時需要注意這些

    日期:2018-10-12瀏覽:3012次

        巴氏染色液的注意事項,使用場所應通風,涂片厚薄適宜,固定后方可染色,制片用高于95%以上濃度的乙醇固定后會出現染色過深,應用95%乙醇固定。蘇木精染液上有一層金屬膜,下有結晶沉淀,使用前應用濾紙過濾。蘇木精染液在染夠2000~3000張玻片后應更換新的染液。蘇木精的染色時間隨氣溫和染液情況而改變。染液以覆蓋涂片為宜,過少因蒸發導致染料沉淀。鹽酸酒精分化的作用為分化掉胞漿上沾上的蘇木素,因此時間不宜長,但如果分化不夠,會造成細胞核顏色過深或(及)胞漿很難上色;分化后立即用自來水沖洗,不宜久置,否則可使全部顏色消失。返藍亦稱堿化,返藍時間偏短則著色不充分,影響染色效果,碳酸鋰每缸過500張玻片更新。橘黃G染色時間不宜過長,否則EA50不易上色;橘黃每缸過1000張玻片更新。EA50或EA36使用前要充分攪拌,染色過程中提拿、旋轉染色架數次。每缸過1000~1800張玻片后更新。
        技術人員操作要流暢,動作干凈利落,不可把上一缸染色液帶入下一缸,每缸交替時要甩干玻片上殘存液體。細胞漿著色不佳應考慮的因素。如果全片內胞漿都淡染,則需延長染色時間或更換新液。如果胞漿不分色或均為淺紅色,適當增加染色時間能夠部分糾正不分色狀況。胞漿染成灰色或紫色是由于蘇木素染色時間過長或鹽酸酒精分化不佳,經過褪色后重新蘇木素染色可以糾正。由于標本的不同,同樣配方的EA染液可造成偏藍、偏綠和偏紅,對不同的標本應使用不同的EA染液,一般認為:EA36和EA50較適用于婦科標本,而EA65或改良EA較適用于非婦科標本。胞漿不分色的另一重要原因是由于EA染液的pH值不恰當所致。如染色為紅色,可加少許磷鎢酸溶液糾正。如染色均為藍色或綠色,可加少許飽和碳酸鋰溶液糾正。
        對于改良EA染液,每100ml染液加入2ml冰醋酸后染色效果更佳,染液使用更持久。細胞核著色不佳應考慮的因素,細胞核著色過淺,鹽酸分化時間過長或蘇木精染色液使用時間過短,需要縮短分化時間或延長堿化時間。蘇木精染色液缸中每日加入少量新鮮蘇木精染液。細胞核著色過深,鹽酸溶液濃度不夠,適當加入幾滴鹽酸以增加濃度,返藍時間過長,則可縮短返藍時間或用水充分漂洗。生產批號、有效期見外包裝。

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